血吸虫病小鼠动物模型在人体寄生虫学教学中的

血吸虫病仍是中国流行的一种重要寄生虫病，2016年全国血吸虫病发病数为2 924例，依然威胁着疫区人民的健康。在医学基础课程人体寄生虫学教学过程中，血吸虫病要求学生重点掌握。但因为血吸虫重点难点内容较多，内容抽象难于理解，仅通过扁平化的理论授课形式学习血吸虫的生活史、 发病机制以及临床表现等内容，学生往往无法有效建立血吸虫各知识点之间的逻辑联系，对血吸虫病内容掌握不牢，使得教学效果不佳。血吸虫动物模型能够很好模拟其在人体的感染机制和发病过程，为辅助教学提供理想的工具。日本血吸虫的动物模型有多种，其中小鼠动物模型因其制作成本低，操作方便更适合应用于课堂教学[1]。小鼠动物模型能让学生直接观察到血吸虫多个主要发育阶段的形态、寄生部位、宿主病变、主要器官的病理变化、对于理解血吸虫的生活史、认识血吸虫发病机制并为建立其与临床症状的立体联系提供有效学习手段。虽然人们一致认同小鼠动物模型在教学过程中的有效作用[2- 5]，但如何规范地发挥其教学功能仍值得深入探讨。因此制作血吸虫病模型并成功应用于教学，将成为提高教学质量的关键所在。

本文旨在通过建立日本血吸虫小鼠动物模型，将之应用于人体寄生虫学课堂教学，探索规范的教学方法，加深学生对该病的理解，同时也为人体寄生虫学课堂上其他相关动物模型的建立和规范化教学积累经验。

1 感染小鼠的制作

为使每个同学获得实习机会，可将学生分成小组，3～4人/组为宜。根据小组数购入适量的阳性钉螺和6周龄昆明鼠(18～22 g)。授课前6周着手制作疾病模型。光照下使阳性钉螺在清水中释放日本血吸虫尾蚴同时固定小鼠并腹部脱毛，低倍镜下计数水样中尾蚴数目，通过腹部贴敷的方式定量感染。每鼠感染30条尾蚴，时间约10 min(图1)。感染后剩余钉螺置于4 ℃冰箱保存，小鼠常规饲养至授课前备用。留取数只未感染小鼠作为对照。

White arrow shows the attached cover glass图1 腹部皮肤贴敷法感染日本血吸虫尾蚴Fig 1 Mouse infected with Schistosoma cercariae on shaved abdominal skin by the means of direct attachment

2 感染模型的教学示范

2.1 活尾蚴镜下观察

钉螺作为日本血吸虫唯一中间宿主，是尾蚴的唯一来源，尾蚴寄生于钉螺的血淋巴腔中，可直接将阳性钉螺置于2片载玻片之间，稍加用力将钉螺压碎，使尾蚴被迫溢出。在钉螺破碎组织上加数滴清水，置于低倍镜下，指导学生观察活体尾蚴的结构及活动特点。注意在操作过程中提醒学生勿触碰含有尾蚴的样品，防止尾蚴感染。

2.2 感染小鼠一般状况的观察

经过6周左右的感染，小鼠处于急性血吸虫病发病阶段，将出现较为明显的症状和体征，主要包括周身被毛粗糙，毛色晦暗，被毛沾有污物。因早期炎性病变导致腹腔脏器如肝脏、脾脏和肠道的肿胀，少量腹水产生，使得小鼠腹部隆起，与正常小鼠比明显增大。虫卵大量沉积在结肠壁引起肠道炎性改变导致消化道症状，小鼠出现腹泻，因此常见肛门沾有污物(表1)。

表1 感染小鼠与正常小鼠相比出现的症状和体征Table 1 Symptoms and signs of schistosomiasisin infected micelocationsofdisorderinfectedmousenormalmousehairsticky,gloomysmooth,glossyabdomendistendedflatanuscontaminatedwithfe-cesclean

2.3 感染小鼠腹腔脏器的病变

拉颈处死小鼠并固定于蜡盘，自腹部下缘解剖小鼠，上至暴露肝脾，充分展示内脏器官，以正常小鼠为对照，观察其腹腔重要脏器外观的病理改变。要求学生注意观察的病理改变内容包括：有无腹水、肝脏大小、颜色、结节改变、脾大小、结节改变和肠壁病理变化等(表2)。待观察完2.4血吸虫成虫寄生部位后，将小鼠肝脾取下，置于体视镜下对比观察脏器病变情况(图2)。

表2 感染小鼠与正常小鼠相比腹腔重要脏器病理变化Table 2 Pathological changes of abdominal organs in infected micelocationsandorganstraitsinfectedmousenormalmouseabdominalcavityasceticfluidND*liversizesignificantenlargementnormalcolordarkredbrightredtexturestiffsoftedgeunevensmoothegggranulomayellow,largenumber,dispersiveNDspleensizesignificantenlargementnormalegggranulomayellow,occasionalNDcolonwallswellingnormalegggranulomayellow,largenumber,dispersiveND

Liver (A right) and spleen (B right) of infected mouse are compared to the normal liver (A left) and spleen (B left), the arrows indicate egg granulomas on the surfaces of liver and spleen图2 与正常小鼠对比，感染小鼠的肝脾病变情况Fig 2 Pathological changes of liver and spleen in infected mice

文章来源：《中国血吸虫病防治杂志》 网址: http://www.zgxxcbfzzz.cn/qikandaodu/2020/1011/373.html